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（二）pcr扩增

1.引物设计和合成hpv基因组可分为早期区（e）和晚期区（l），每区含一系列开放读码框架（orf）。序列分析表明，各型hpv的非编码区及e1、e6、e7和l1区均有保守序列。manos等从hpvl1区中选择保守序列设计合成引物my11和my09见表1，该引物与hpv6、11、16、18及33型有互补序列，也可扩增其它型hpv。

2.pcr反应试剂taqdna聚合酶（2u/ml）、10mmol/ldntp贮备液（datp、dctp、dgtp、dttp各10mmol/l），10×。pcr缓冲液（500mmolkcl、40mmol/lmgcl2、100mmol/ltris-hcl、ph8.5），100μmol/lmy11和my09贮备液，灭菌的玻璃蒸馏器制备的蒸馏水。

3.pcr扩增方法和程序以100μlpcr反应液，用无菌0。5ml硅化塑料离心管为反应管进行扩增反应。