5大检查让尖锐湿疣现形

（1）实验前配制预混反应试剂并分装。预混反应试剂包括除标本dna外的其它各种pcr反应试剂。

（2）各反应管依次加入10μl标本和90μl预混反应试剂。

（3）加入80-100μl石蜡油，在台式离心机上快速离心数秒钟，使各反应试剂收集于油层下。目前，pcr试剂已商品化，反应体积为25μl。使用时只加入标本dna即可。

（4）将反应管置pcr扩增仪上，循环参数为95℃30s，55℃40s，72℃50s循环35次，最后72℃延伸5min。

4.每次试验应设阳性及阴性对照。以载有hpv的重组质粒（每反应为100pg）或含有hpv的细胞系（如caski、hela）dna为阳性对照，以无hpv的人细胞系dna为阴性对照。