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如何正确诊断生殖器疱疹?

导读:培养法从水疱底部取材做组织培养分离病毒,为目前较敏感最特异的检查方法,需5-10天,因其技术条件要求高,价格昂贵,不能普遍使用。

如何正确诊断生殖器疱疹?

2、pcr扩增

(1)引物设计选择hsv-1icpo基因(极早期)为检测靶基因。设计2个引物,

p15′ggatcctcacgtggttacccgcggtct3′

p25′aagcttccggggccgtccccgcgggcg3′可以扩增icpo中266bp序列。

1个探针5′ccggctggagccgccgcaccctgct3′。

(2)pcr实验体系总反应体积为50μl,模板10μl(0.25-1.0μg)p11μl(20pmol/l)。p21μl(20pmol/l)。4×。dntp4μl(200μmol/l)。10×。缓冲液5μl。amv(逆转录酶)2μl(50u)。dw26μl。循环参数,94℃变性2min后94℃50s,60℃60,72℃60s,循环40次后72℃延伸5min。

3、扩增产物的鉴定

(1)琼脂糖凝胶电泳染色法取10μlpcr扩增产物加4μl样品缓冲液,混匀后加样2%琼脂糖凝胶板,70v电泳15-20min,eb染色5min。紫外灯下观察扩增条带。

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