1.标本处理
(1)标本采集,方法同上。
(2)dna模板制备每份标本取200μl,按200μg/ml加入蛋白酶k,56℃作用
加入等体积的酚—氯仿(v/v)轻摇10min,离心1000r/min×。5min。取水相加入500μl(2.5倍体积)无水乙醇,-20℃过夜沉淀dna,离心15000r/min×。5min,吸去液体,30℃干燥后,加蒸馏水25μl溶解,待检。
2.引物设计
p1,5′cgactttgccagcctgtacc3′
p2,5′agtccgtgtccccgtagatg3′
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