(3)southern印迹法pcr产物20μl经电泳分离后,用变性液处理60min,再用中和液处理90min,转移至硝酸纤维素膜上80℃烤膜2h,42℃预杂交(杂交液中)30min,加入32p标记hsvp3探针后,42℃杂交过夜。次日用1%sds/pbsph7.2,42℃洗15min,0.5%sds/pbsph7.2,42℃洗15min。膜置x线暗盒内放射性自显影12~15h,显影为阳性,不显影为阴性。
(二)套式
套式pcr(nestedprimers-polymerasechainreaction,np-pcr)是通过“外侧”、“内侧”两对引物,即一对扩增较大dna片段的“外侧”引物和一对位于扩增产物中再扩增小片段的“内侧”引物,这样两次连续放大可以提高pcr检测的灵敏度,保证产物的特异性。但该方法不能分型,能100%检出hsv-1,50%检出hsv-2,应改进分型检测hsv,更好地在临床应用和基础研究中推广应用。