首页 菜谱 分类 食材 百科 资讯 运动
当前位置:首页 > 健康 > 皮肤性病

如何正确诊断生殖器疱疹?

导读:培养法从水疱底部取材做组织培养分离病毒,为目前较敏感最特异的检查方法,需5-10天,因其技术条件要求高,价格昂贵,不能普遍使用。

如何正确诊断生殖器疱疹?

(2)标本处理

①预处理所有液体标本均可直接进行模板制备。可以取100μl标本液,离心5000r/min×。5min后,去上清,取沉淀物进行模板制备。

②模板制备a蛋白酶k消化裂解法沉淀物加100μl蛋白酶k消化裂解液,55℃1h后,煮沸10min,离心5000r/min×。5min,收集上清。b水煮法沉淀物加100μl蒸馏水,摇均水煮20min,离心5000r/min×。5min收集上清。c1%tritonx-100裂解法取采集的标本液100μl,加入1μltritonx-100,水煮20min,5000r/min×。5min,收集上清。d5%np-40裂解法取采集的标本液100μl,加5μlnp-40,水煮20min,5000r/min×。5min收集上清。e如标本溶血严重经上述裂解处理后,再加等体积酚-氯仿抽提、冷乙醇沉淀dna,加10μldw溶解待检。

2、pcr扩增

(1)引物设计。以hsvdna聚合酶的高保守区为检测靶序列以确保特异性。设计3个引物,一个上游共同性引物,dnap5(5′atggtgaaaacatcgacatgtacgg3′)二个下游特异性引物,dnap3-1(5′cctcgcgttcgtcctcgtcctcc3′)和dnap3-2(5′cctccttgtcgaggccccgaaac3′),可以分别扩增出hsv-1469bpdna片段(1981~2359)、hsv-2391bp片段(1561~1953)从二型pcr扩增产物中设计了一个不分型的特异性探针hsvp35ggcgtagtaggcggggatgtcgcg3‘)。

点赞(0)
分享到:
收藏(0)

猜您喜欢

扫一扫手机查看